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EFFICACIA ANTIBATTERICA

Metodologia d'analisi

Ceppi batterici e tempi di esposizione

ISO 22196:2011, ASTM E 214.

Inoltre è stato creato dal Dipartimento di Scienze Biomediche, Chirurgiche e Odontoiatriche – Sezione One Health dell’Università di Milano un metodo specifico per la zootecnia per simulare l’ambiente di lavoro.

Ceppi batterici e tempi di esposizione

La prova di abbattimento della carica è stata eseguita utilizzando una piastra per colture cellulari a 24 pozzetti (Ø16 mm, volume 1 mL).

Per permettere una manipolazione migliore dei fogli in elastomero, ne è stata campionata una sezione rettangolare di 5cm x 8cm ed è stato “punzonato” un dischetto di dimensioni idonee all’introduzione nella piastra di cui sopra.

Con una pinza sterile ogni dischetto è stato deposto sul fondo di un pozzetto e ricoperto con 1 mLdi ciascuna sospensione batterica.

Abbiamo utilizzato sei specie batteriche (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcusagalactiae ATCC 13813, Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella ATCC 25928,Listeria ATCC 13932 e Legionella ATCC 33152 a due concentrazioni diverse: 10³ UFC/mL e 10⁴ UFC/mL.

I tempi di esposizione (time-point) utilizzati per avere un’indicazione dell’eventuale dinamica di abbattimento della carica batterica sono stati:

– T0: contatto con elastomeri

– T1: 5 minuti post-contatto (PT)

– T2: 30 minuti PT

– T3: 1 ora PT

– T5: 6 ore PT

– T6: 24 ore PT.

Ad ogni time-point au’aliquota di sospensione microbica (50µL) è stata opportunamente diluita in soluzione fisiologica sterile (naCl 0.9%) e seminata (50 µL) in piastra con terreno solido. Dopo incubazione a 37°C per 24 ore, le colonie sono state contate per ottenere la carica di partenza ad ogni time-point.

EFFICACIA ANTIVIRALE

Metodologia d’analisi

Virus e cellule utilizzati e metodi

l ceppo utilizzato è descritto in tabella 2.2.1, insieme alla linea cellulare ospite Il virus originale stato scongelato e fatto adsorbire sulle cellule al 90% circa di confluenza secondo quanto descritto nella norma UNI EN 12353:2021, e quindi lasciato incubare a 35°C± 1°C con il 5% di COz fino ad ottenere un titolo TID50/ml pari a circa 6 Log.

Le cellule MDCK vengono coltivate in MEM + 10% FBS, addizionato con L-glutammina, aminoacidi non essenziali, penicillina e streptomicina (growth medium).

Per l’esecuzione del test vengono impiegate cellule all’80-90% di confluenza, e il terreno è addizionato con tripsina, BSA e HEPES buffer (maintenance medium).

Calcolo atività antivirale

Valutazione dei risultati

L’infettività virale è calcolata con la seguente formula:

S = (10 x P)

dove:
S: infettività del virus per ml per sospensione del test
P: TCID50 medio

Per ogni campione viene determinata l’infettività del virus recuperato, con la seguente:

N = (10 x TCID50/ml x V) / A

dove:
N: infettività del virus recuperato per cm2 di campione
V: volume in ml del brodo SCDLP aggiunto al campione
A: superficie del film di copertura in cm²

Per calcolare l’attività antivirale viene utilizzata la seguente formula:

R = (Ut – Uο) – (At – U0) = Ut – At

Dove:
R: attività antivirale

Uο: media del logaritmo del TCID50/cm2 dei tre campioni non trattati subito dopo l’inoculo
Ut: media del logaritmo del TCID50/cm2 dei tre campioni non trattati dopo il tempo di contatto
At: media del logaritmo del TCID50/cm2 dei tre campioni trattati dopo il tempo di contatto

L’efficacia antivirale del trattamento viene valutata in base all’abbattimento logaritmico R.

Sicurezza

Gli Elastomeri SCUDO consentono di garantire alti livelli di igiene grazie alla loro proprietà, eliminando virus e batteri dalle superfici in modo costante e completo.

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Risparmio

Grazie agli Elastomeri SCUDO, applicate in una varietà di settori, è possibile ridurre il rischio di infezioni da virus e batteri, con una riduzione dell’uso di antibiotici.